期刊简介
本刊是随着社区卫生服务事业的发展应运而生，办刊宗旨是促进社区卫生事业的发展，促进社区卫生服务人员业务水平的提高，加强社区卫生事业的科学研究，促进社区医学信息的交流。
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首页>社区医学杂志
- 杂志名称：社区医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会
- 国际刊号：1672-4208
- 国内刊号：10-1026/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中)
pEGFP-smac重组质粒的构建及在sw-480结肠癌细胞中的表达
郭宝强；李维山；高凤兰；宋国华
关键词：凋亡激活因子, 绿色荧光蛋白, 质粒构建, 基因转染, 结肠癌
摘要：目的 构建一种含凋亡激活因子(second mitochondrial activator of caspase,SMAC)的重组质粒pEGFP-smac,观察其在结肠癌细胞中的表达,为探讨SMAC在结肠癌中抗凋亡作用的分子机制,为结肠癌的治疗提供理论依据.方法从sw-480结肠癌细胞中提取总RNA,以RT-PCR技术扩增SMAC全长基因后,与绿色荧光表达质粒pEGFP-N1构建pEGFP-smac重组质粒,转染sw-480细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光的表达,并对表达产物进行Western blot鉴定.结果 RT-PCR产物及含有重组质粒的菌落PCR产物经琼脂糖电泳,在预期位置(720 bp)处均有目的条带出现;重组质粒成功转染sw-480细胞,在荧光显微镜下强绿色荧光蛋白表达,Western blot鉴定结果显示pEGFP-smac上的SMAC基因在sw-480细胞中正确表达.结论 成功构建pEGFP-smac重组质粒,可为进一步研究SMAC蛋白的功能提供重要的分子工具.
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